Pisang cavendish (Musa paradisiaca L) memiliki nilai ekonomi yg tinggi, merupakan buah tropis yg digemari masyarakat Indonesia juga Internasional. Perkembang biakan pisang cavendish termasuk lambat sehingga dibutuhkan cara perbanyakan yang cepat dan efisien yakni secara kultur in vitro. Perbanyakan pisang cavendish melalui teknik kultur jaringan (in vitro) di tahap aklimatisasi bibit pisang hasil kultur jaringan memerlukan komposisi media tanam yang sempurna buat pertumbuhannya selama aklimatisasi, buat menghadapi kebutuhan bibit pada jumlah banyak. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pemberian NAA serta perlakuan Kombinasi Media Tanam. Penelitian dilaksanakan di bulan oktober – januari 2021 di lingkungan Lab biologi Fakultas Pertanian Universitas Tribhuwana Tunggadewi Malang. Penelitian dilakukan dengan memakai Rancangan Acak Lengkap Faktorial (RAL.F) dengan faktor pertama yaitu yaitu konsentrasi perendaman NAA. N0 = Tanpa NAA), N1 = (100 mg/L ), serta jenis komposisi media tanam = M₁ = Tanah + Arang Sekam , M₂ = Tanah + Arang Sekam + Bokasi, M₃ = Tanah + Arang Sekam + Cocopeat, M₄ = Tanah + Arang Sekam + Pasir. hasil diperoleh, bahwa terdapat hubungan atau interaksi antara NAA dengan jenis komposis media tanam terhadap parameter Pertambahan Tinggi Bibit. di umur dua minggu hasil tertinggi pada perlakuan N1M3 (Tanah + Arang Sekam+ Cocopit) dan pada umur 4 minggu di perlakuan N1M1 (Tanah + Arang Sekam) Penggunaan NAA dan jenis media mampu membentuk pertambahan tinggi bibit serta jumlah daun terbaik Jika memakai hormon NAA (100 Mg/L) dan jenis kombinasi media tanam. Tanah + Arang Sekam + Cocopit atau Tanah + Arang Sekam + Pasir (1:1:1).